Le rôle des protéines NS5A et Core du virus de l’hépatite C dans la régulation des gènes liés à la fibrose sur les cellules Huh7 via l’activation des cellules LX2

Introduction

Le carcinome hépatocellulaire (CHC) est considéré comme la principale forme de cancer du foie et la deuxième cause de décès par cancer dans le monde, avec environ 140 000 cas attribuables à une infection chronique par le virus de l’hépatite C (VHC). Le VHC est un virus à ARN à sens positif qui encode une polyprotéine générant différentes protéines structurelles et non structurelles. Les dommages chroniques au foie causent une régénération tissulaire non régulée, conduisant à une fibrose progressive. Si elle n’est pas inversée, cela peut mener au développement du CHC. Malheureusement, il n’existe pas encore de médicaments approuvés pour le traitement de la fibrose hépatique.

Le rôle des protéines NS5A et Core du virus de l'hépatite C dans la régulation des gènes liés à la fibrose sur les cellules Huh7 via l'activation des cellules LX2

Méthodes et Matériaux

Nous avons évalué les mécanismes moléculaires associés à la fibrose lors d’une co-culture de cellules stellaires hépatiques humaines (LX2) avec des hépatocytes humains (Huh7) exprimant les protéines NS5A ou Core du VHC. Nous avons déterminé le profil d’expression des gènes associés à la fibrose dans les cellules Huh7 exprimant les protéines NS5A ou Core pendant la co-culture avec les cellules LX2.

Résultats

Nous avons observé que NS5A induisait des changements de 8,3, 6,7 et 4 fois, et que Core induisait des changements de 6,5, 1,8 et 6,2 fois dans l’expression des gènes collagen1, TGFb1 et timp1, respectivement, dans les cellules LX2 co-cultivées avec des cellules Huh7 transfectées. De plus, NS5A induisait l’expression de 30 gènes tandis que Core induisait 41 gènes et réduisait l’expression de 30 gènes liés à la fibrose dans les cellules Huh7 pendant la co-culture avec les cellules LX2, par rapport au contrôle. Les voies moléculaires enrichies à partir du profil d’expression des gènes étaient impliquées dans la signalisation TGFB et l’organisation de la matrice extracellulaire.

Discussion

Nos résultats ont démontré que l’expression des protéines NS5A et Core du VHC régule l’activation des cellules LX2. L’activation des cellules LX2 induite par NS5A et Core régule à son tour l’expression de divers gènes liés à la fibrose à différents niveaux dans les cellules Huh7, ce qui peut être analysé plus avant comme des cibles potentielles anti-fibrotiques pendant l’infection par le VHC.

Analyse des voies moléculaires

Les gènes différentiellement exprimés (DEGs) obtenus dans l’Array qPCR ont été analysés par Enrichr. L’analyse des voies de signalisation enrichies révèle que les cellules NS5A-Huh7 sont principalement associées aux voies de signalisation du récepteur TGFb et à l’organisation de la matrice extracellulaire à 48 et 72 heures de co-culture avec les cellules LX2, respectivement. De plus, l’analyse GO a révélé que la liaison au récepteur TGFb et l’activité du ligand récepteur étaient des fonctions moléculaires enrichies à 48 et 72 heures de co-culture, respectivement.

Conclusion