Le rôle des protéines NS5A et Core du virus de l’hépatite C dans la régulation des gènes liés à la fibrose

Introduction

Le carcinome hépatocellulaire (CHC) est la principale forme de cancer du foie et la deuxième cause de décès par cancer dans le monde, avec environ 140 000 cas attribuables à une infection chronique par le virus de l’hépatite C (VHC). Le VHC est un virus à ARN à sens positif qui encode une polyprotéine générant différentes protéines structurelles et non structurelles. Les dommages chroniques au foie entraînent une régénération tissulaire non régulée, conduisant à une fibrose progressive. Si elle n’est pas inversée, cela peut conduire au développement du CHC. Malheureusement, aucun médicament n’a encore été approuvé pour le traitement de la fibrose hépatique.

Méthodologie

Nous avons évalué les mécanismes moléculaires associés à la fibrose lors d’une co-culture de cellules stellaires hépatiques humaines (LX2) avec des hépatocytes humains (Huh7) exprimant les protéines NS5A ou Core du VHC. Nous avons déterminé le profil d’expression des gènes associés à la fibrose dans les cellules Huh7 exprimant les protéines NS5A ou Core pendant la co-culture avec LX2.

Résultats

Nous avons observé que NS5A induisait des changements de 8,3, 6,7 et 4 fois, et que Core induisait des changements de 6,5, 1,8 et 6,2 fois dans l’expression des gènes collagen1, TGFb1 et timp1, respectivement, dans les LX2 co-cultivées avec des Huh7 transfectées. De plus, NS5A induisait l’expression de 30 gènes tandis que Core induisait 41 gènes et réduisait l’expression de 30 gènes liés à la fibrose dans les cellules Huh7 pendant la co-culture avec LX2, par rapport au contrôle. Les voies moléculaires enrichies à partir du profil d’expression des gènes étaient impliquées dans la signalisation TGFB et l’organisation de la matrice extracellulaire.

Discussion

Nos résultats ont démontré que l’expression des protéines NS5A et Core du VHC régule l’activation des cellules LX2. L’activation des LX2 induite par NS5A et Core régule à son tour l’expression de divers gènes liés à la fibrose à différents niveaux dans les cellules Huh7, ce qui peut être analysé davantage comme des cibles potentielles anti-fibrotiques pendant l’infection par le VHC.

Analyse des voies moléculaires

Les gènes différentiellement exprimés (DEGs) obtenus dans l’Array qPCR ont été analysés par Enrichr. L’analyse des voies de signalisation enrichies révèle que les cellules NS5A-Huh7 sont principalement associées aux voies du récepteur TGFb et à l’organisation de la matrice extracellulaire. De plus, l’analyse GO a révélé que la liaison au récepteur TGFb et l’activité du ligand du récepteur étaient des fonctions moléculaires enrichies. Les composants cellulaires et les processus biologiques les plus associés étaient la matrice extracellulaire contenant du collagène et l’organisation de la matrice extracellulaire.

Conclusion

Nos résultats ont démontré que l’expression des protéines NS5A et Core du VHC régule l’activation des cellules LX2. L’activation des LX2 induite par NS5A et Core régule à son tour l’expression de divers gènes liés à la fibrose à différents niveaux dans les cellules Huh7, ce qui peut être analysé davantage comme des cibles potentielles anti-fibrotiques pendant l’infection par le VHC.

Auteurs

Tania G. Heredia-Torres, Veronica Alvarado-Martínez, Ana R. Rincón-Sánchez, Sonia A. Lozano-Sepúlveda, Kame A. Galán-Huerta, Daniel Arellanos-Soto, Ana M. Rivas-Estilla

Références

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